化妝品眼刺激性試驗(yàn)方法雞胚絨毛尿囊膜試驗(yàn)介紹:測試化妝品對(duì)眼的刺激強(qiáng)度

92次 2025.01.06

  隨著生活水平的提高,大眾對(duì)化妝品安全性的要求也越來越高,越發(fā)關(guān)注產(chǎn)品的天然、溫和、無刺激等特性。眼刺激性評(píng)價(jià)是化妝品原料及產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容。傳統(tǒng)眼部刺激試驗(yàn)采用試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行,如經(jīng)典的 Draizer免眼試驗(yàn),不僅外推到人具有一定的風(fēng)險(xiǎn),而且造成動(dòng)物極大的痛苦。


  近年來,在全球化動(dòng)物保護(hù)運(yùn)動(dòng)的影響下,多種替代動(dòng)物試驗(yàn)的體外方法得到開發(fā)和應(yīng)用,其中眼刺激性替代試驗(yàn)有雞胚絨毛尿囊膜試驗(yàn)(Hen's egg test on the chorioallantoic membrane, Het -Cam Test)、重組人角膜組織模型(Human Corneal Epithelium Models,HCEM)、中性紅攝取試驗(yàn)(Neutral Red Uptake Test,NRU)、紅細(xì)胞融血試驗(yàn)(Red Blood Cell Test,RBC)等。在這些替代試驗(yàn)中,雞胚絨毛尿囊膜試驗(yàn)因其費(fèi)用低、操作簡便與人體試驗(yàn)結(jié)果相關(guān)性高等原因,已成為目前化妝品及化學(xué)品眼刺激性體外試驗(yàn)的主要研究方法之一。




  作為第三方檢測中心,中科測試機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測資質(zhì),檢測設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學(xué)可靠,可出具國家認(rèn)可的化妝品眼刺激性試驗(yàn)報(bào)告。


  眼刺激性試驗(yàn)方法


  將化妝品樣品用去離子水配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的溶液。


  參照出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中化妝品眼刺激性/腐蝕性的雞胚絨毛尿囊膜試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn),采用反應(yīng)時(shí)間法,將9日齡雞胚進(jìn)行照蛋檢查,在蛋殼表面標(biāo)記氣室位置;用牙科鋸齒彎鑷剝?nèi)?biāo)記的蛋殼部分,暴露白色蛋膜。


  用吸管吸取適量質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.9%NaCl溶液使蛋膜濕潤后,將溶液傾出。小心用鑷子去除內(nèi)膜,保證血管膜不受損。分別吸取0.3mL的被測試劑,滴加在絨毛尿囊膜表面,記錄5min內(nèi)開始出現(xiàn)出血、血管融解、凝血的時(shí)間,期間錄影并拍照,每款化妝品樣品做6次平行試驗(yàn)。


  眼刺激性評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)


  根據(jù)采用反應(yīng)時(shí)間法,即IS(刺激評(píng)分)法作為評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)計(jì)算出的IS數(shù)值,按以下范圍對(duì)受試物眼刺激性進(jìn)行分類。


  雞胚絨毛尿囊膜試驗(yàn)的眼刺激分級(jí)為:IS<1、1≤IS<5 、5≤IS<9和  IS≥9分別表示無刺激性、輕刺激性、中度刺激性和重度刺激性4個(gè)級(jí)別。


  根據(jù)文獻(xiàn),將出血、凝血、血管融解劃分為不同等級(jí)。


  出血:1)無出血;2)輕度出血,僅見小血管出血和少量出血(如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%ASV作用5 min);3)中度出血,小血管和大血管出血,并有明顯的血液流出(如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%ASV作用5min);4)重度出血,幾乎所有的血管出血,并有大量的血液流出( 如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 5% ASV 作用5 min)。


  凝血:1)無凝血;2)輕度凝血,血管內(nèi)或(和)血管外輕度凝血(如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%氧化鈉作用5 min);3)中度凝血,血管內(nèi)或( 和)血管外中度凝血(如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%氫氧化鈉作用5min);4)重度凝血,血管內(nèi)或(和)血管外重度凝血(如質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.5%氫氧化鈉作用5min)。


  血管融解:1)無血管融解;2)輕度血管融解:僅小血管融解(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%ASV作用5min);3)中度血管融解,小血管和大血管融解( 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%ASV作用5min);4)重度血管融解,大血管和全部血管樹都融解( 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%ASV作用5min)。


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