抑菌試驗(yàn)方法有哪些 抑菌圈實(shí)驗(yàn)步驟分析

86次 2025.01.08

  抑菌主要是利用一系列手段降低細(xì)菌的活性,阻止其數(shù)量增加,從而減少對健康或特定環(huán)境的潛在威脅?。抑菌試驗(yàn)在多個(gè)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,如新開發(fā)的防腐劑、抗菌劑、植物精油以及藥物(包括中草藥)等領(lǐng)域的研究中,都需要通過抑菌試驗(yàn)來評價(jià)其抑菌性能?。


  抑菌試驗(yàn)方法


  1、微量稀釋法


  微量稀釋法是一種更為精確的抑菌試驗(yàn)方法,主要用于測定最小抑菌濃度(MIC),通過將抗菌藥物與待測微生物在多個(gè)濃度梯度下共同培養(yǎng),觀察哪個(gè)濃度能完全抑制微生物生長,從而確定MIC,評估抑菌效果。


  這種方法精確度高適用于對抗生素、消毒劑等抑菌物質(zhì)的評估。


  2、菌落形成單位法


  菌落形成單位(CFU)是活菌計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)單位,菌落形成單位法(CFU法)是一種通過計(jì)算菌落形成單位來評估抑菌效果的方法,CFU法比傳統(tǒng)菌落數(shù)更準(zhǔn)確。該方法通過將菌液稀釋后涂布在平板上,培養(yǎng)后計(jì)數(shù)形成的菌落數(shù),并乘以稀釋倍數(shù)得到活菌總數(shù)。


  CFU法能夠更精確地反映樣品中的活菌數(shù)量,是微生物學(xué)研究和質(zhì)量控制中的常用方法。CFU法適用于評估消毒劑、防腐劑等抑菌物質(zhì)的效果。


  3、平板計(jì)數(shù)法


  平板計(jì)數(shù)法是一種傳統(tǒng)且直觀的抑菌試驗(yàn)方法,通過將被測樣品與菌液共培養(yǎng)后,稀釋并涂布在瓊脂平板上,觀察并計(jì)數(shù)形成的菌落數(shù)來評估抑菌效果。


  這種方法具有操作簡單、結(jié)果直觀、成本低廉的優(yōu)點(diǎn),但同時(shí)也存在一些局限性,如對菌落計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性要求較高,且對某些難以培養(yǎng)的微生物可能無法準(zhǔn)確評估。


  4、時(shí)間-殺菌曲線法


  時(shí)間-殺菌曲線法是一種動(dòng)態(tài)觀察抑菌效果的方法,通過在不同時(shí)間點(diǎn)取樣計(jì)數(shù),評估抗菌藥物的殺菌速度和作用持續(xù)時(shí)間。繪制時(shí)間-菌落數(shù)對數(shù)值曲線,斜率反映殺菌速率。


  該方法能提供藥物動(dòng)態(tài)殺菌效果的全面信息,對優(yōu)化抗菌藥物使用具有重要意義。


  抑菌圈實(shí)驗(yàn)步驟分析


  抑菌圈試驗(yàn),又稱為瓊脂擴(kuò)散法,是用于評估抗菌藥物對特定微生物抑制效果的常用方法。試驗(yàn)步驟如下:


  制備菌懸液:將試驗(yàn)菌株培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中,然后用生理鹽水調(diào)整菌懸液濃度,通常調(diào)整到0.5麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)。


  接種瓊脂平板:用無菌棉簽蘸取菌懸液,均勻涂布于Muller-Hinton瓊脂平板表面,確保整個(gè)平板都被菌液覆蓋。


  放置藥片:將含有抗菌藥物的藥片或?yàn)V紙片放置在涂有菌液的瓊脂平板上。每個(gè)平板上可以放置多個(gè)藥片,但要確保藥片之間有足夠的間距,防止抑菌圈重疊。


  培養(yǎng):將接種后的平板倒置,置于37°C的培養(yǎng)箱中孵育16-24小時(shí)。


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