如何評(píng)價(jià)化妝品美白功效?體外測(cè)試法及在體測(cè)試法詳細(xì)介紹

317次 2024.10.08

    皮膚顏色是人體皮膚表面呈現(xiàn)出的色度、色澤,是判斷皮膚、身體健康與否的重要標(biāo)準(zhǔn)。隨著人們對(duì)美白化妝品需求的增長(zhǎng),宣稱具有美白功效的化妝品及其原料的產(chǎn)品與日俱增。那么,如何科學(xué)、客觀地評(píng)價(jià)化妝品及其原料的美白功效呢?



    中科檢測(cè)是專業(yè)的化妝品檢測(cè)與功效評(píng)價(jià)中心,經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門確認(rèn)可承擔(dān)化妝品注冊(cè)和備案檢驗(yàn)等工作,可提供化妝品美白功效評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全檢測(cè)等化妝品安全相關(guān)服務(wù)。


    化妝品美白功效評(píng)價(jià)方法:體外測(cè)試法


    (一)酪氨酸酶活性抑制實(shí)驗(yàn)


    人體膚色的差異主要取決于黑色素的含量及其分布,黑色素主要形成于人體皮膚表皮基底層的黑色素細(xì)胞,黑色素細(xì)胞組織中的酪氨酸在酪氨酸酶等酶的作用下,經(jīng)多巴、多巴醌、多巴色素、二羥基吲哚等中間體逐步轉(zhuǎn)化為真黑色素。其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶,其活性大小決定黑色素形成的數(shù)量。對(duì)酪氨酸酶抑制作用的強(qiáng)弱可作為評(píng)價(jià)增白化妝品的重要參考指標(biāo)。


    酪氨酸酶活性抑制試驗(yàn)是利用從蘑菇中提取到的酪氨酸酶,以-酪氨酸或L-多巴為底物,在體系中加入待測(cè)物、對(duì)照品和酪氨酸酶等成分進(jìn)行反應(yīng),并測(cè)量其吸光值,計(jì)算得到酪氨酸酶抑制率,從而表征待測(cè)物對(duì)酪氨酸酶活性的抑制。


    (二)抗氧化、抗炎試驗(yàn)


    由于紫外線、體內(nèi)代謝等內(nèi)外因素均會(huì)促使機(jī)體產(chǎn)生氧自由基、炎癥因子等。自由基是人體代謝過程中產(chǎn)生的一種垃圾毒素,人類很多疾病的產(chǎn)生都與自由基有關(guān),自由基可直接或間接調(diào)控酪氨酸酶的表達(dá),調(diào)控黑色素的合成,引起皮膚炎癥、加速皮膚黑色素的產(chǎn)生。所以,抑制自由基的產(chǎn)生從一定程度上可以抑制黑色素的產(chǎn)生。常見的自由基有:DPPH、ABTS、超氧陰離子、羥自由基等??赏ㄟ^測(cè)試樣品對(duì)自由基的抑制率從而表征活性物的抗氧化、美白活性。


    (三)黑色素細(xì)胞中的黑色素含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)


    黑色素細(xì)胞是機(jī)體形成黑色素、分泌黑色素的細(xì)胞,是皮膚細(xì)胞的重要組成之一。所以,通過細(xì)胞生物學(xué)法測(cè)定黑色素細(xì)胞中黑色素含量,是最有力的檢測(cè)美白產(chǎn)品的方法。


    該實(shí)驗(yàn)多通過在體外培養(yǎng)特定的黑色素瘤細(xì)胞模型,采用分光光度法、圖像分析技術(shù)等方法測(cè)試細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性及黑色素含量,從而對(duì)待測(cè)物質(zhì)的美白功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。為更好地模擬人皮膚中黑色素細(xì)胞的生長(zhǎng)、黑色素的分泌,研究黑色素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞間的相互作用和美白功效評(píng)價(jià),現(xiàn)代生物技術(shù)還常常采用黑色素瘤細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)模型。


    (四)黑色素的轉(zhuǎn)移


    黑色素生成后需要進(jìn)行轉(zhuǎn)移才能到達(dá)表皮層,該過程分為兩步:胞內(nèi)轉(zhuǎn)移和胞外轉(zhuǎn)移。胞內(nèi)轉(zhuǎn)移是黑色素細(xì)胞受刺激產(chǎn)生的黑色素體,包裹在黑色素細(xì)胞中向突起末端遷移。所以,可以通過探究受試物抑制黑色素小體轉(zhuǎn)移的方法,進(jìn)而評(píng)價(jià)其美白功效。


    角質(zhì)形成細(xì)胞黑色素?cái)z取實(shí)驗(yàn)先在正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)中加入受試物,后加入帶有熒光的黑色素顆粒,孵化4h后測(cè)量培養(yǎng)基中剩余熒光劑量,以此表示抑制物對(duì)黑色素轉(zhuǎn)移的抑制效果。


    化妝品美白功效評(píng)價(jià)方法:在體測(cè)試法


    (一)皮膚顏色測(cè)試


    客觀儀器評(píng)估是通過儀器對(duì)受試者使用化妝品前后的皮膚狀態(tài)參數(shù)進(jìn)行采集,進(jìn)而對(duì)化妝品進(jìn)行功效評(píng)價(jià)的一種方法,以數(shù)據(jù)或圖片的形式呈現(xiàn)出來,可以最大限度消除人為因素的影響。


    (二)皮膚紅黑色素測(cè)試


    皮膚的顏色主要由皮膚色素含量及其分布決定,人類皮膚的顏色主要取決于人體皮膚中黑色素和血紅素(紅色素)的含量,快速、準(zhǔn)確地測(cè)量皮膚中黑色素和血紅素的含量在化妝品的研制、醫(yī)療、美容、藥品和保健品功效檢測(cè)方面是非常重要的。MexameterMx18也是常用的測(cè)定皮膚色度的一種儀器,其結(jié)果輸出以黑色素指數(shù)(MI)和紅斑指數(shù)(EI)表示,它是基于光譜吸收的原理(RGB),通過特定波長(zhǎng)的光照在人體皮膚上的反射量來確定皮膚中黑色素含量,如果測(cè)量所得MI越高,說明皮膚中所含的黑色素就越高。


    (三)皮膚黑色素含量測(cè)試


    皮膚顏色是由皮膚中幾種發(fā)色團(tuán)的存在和比例引起的,主要包含皮膚中的黑色素、血紅素、類胡蘿卜素的含量與分布。皮膚黑色素含量測(cè)試是一種客觀的分析方法,可使用光密度測(cè)量法量化角質(zhì)層中黑色素的含量。


    使用透明膠帶(氰基丙烯酸酯皮膚表面剝離劑(CSSSs)等)等將受試者的皮膚角質(zhì)層剝離,然后將剝離的樣品用Fotana-Masson銀染色,將樣品置于配有內(nèi)部光密度計(jì)的顯微鏡下,測(cè)定樣品的光透射率,并以220放大倍率拍攝。使用0-10級(jí)的灰度判別來評(píng)估顏色的密度,從而通過計(jì)算來測(cè)定角質(zhì)層細(xì)胞中的黑色素含量。


    (四)皮膚光澤度測(cè)試


    光澤度是構(gòu)成物質(zhì)表面視覺特征的重要參數(shù)之一。皮膚光澤度直接關(guān)系到光線進(jìn)入人眼時(shí)的視覺效果,平時(shí)我們所說的容光煥發(fā)指的就是皮膚的光澤度。所以,測(cè)定皮膚的光澤度一定程度上也可以表征皮膚的美白效果。


    (五)VISIA拍照


    應(yīng)用VISIA拍照,通過對(duì)圖像的分析也可以評(píng)價(jià)化妝品的美白功效。對(duì)于美白功效評(píng)價(jià)可選用標(biāo)準(zhǔn)光、UV光和交叉偏振光采集面部圖像,并使用圖像分析軟件進(jìn)行量化分析,以評(píng)估皮膚顏色的變化。


    (六)主觀評(píng)價(jià)法


    主觀評(píng)價(jià)法包括專家評(píng)估和志愿者自我評(píng)估兩種方法。專家評(píng)估多采用有經(jīng)驗(yàn)的專家通過使用產(chǎn)品前、后膚色的變化就行評(píng)分,從而表征志愿者使用產(chǎn)品前后膚色的變化。志愿者自我評(píng)估多采用調(diào)查問卷的形式,志愿者對(duì)自我膚色的改善情況進(jìn)行評(píng)估。但主觀評(píng)價(jià)法多與客觀儀器評(píng)價(jià)等其他方法結(jié)合,從而全面地表征化妝品的美白功效。


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